細胞凍存1.預先配制凍存液:10%DMSO+90%胎牛血清,4℃冰箱保存預冷;2.用胰酶對細胞進行消化:倒去培養瓶中的培養基或用小心吸去培養板中的培養基,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細胞(盡可能溫和);3.再次用完全...
細胞凍存的步驟如下:1.配制含10%DMSO、20%小牛血清的凍存培養液4mL。2.取出生長良好的細胞。3.吸除舊的培養液:拿出吸管(要拿吸管的上端),插入與抽濾瓶相連的橡膠管中,在酒精燈外焰灼燒滅菌,細胞培養瓶...
1既然沒有-80,就不要舍不得血清了,用90%血清+10%DMSO制備凍存液.2冰上徹底冷卻,但是不結冰,用蓬松的棉花,大概熱水袋那么大,包著凍存管,放入-20降溫,4到6小時后,轉入液氮中....
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調整,凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養,另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質,如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細胞。有人親測10%血清凍存細胞,結果證明是可以的...
1、配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;2、取對數生長期的細胞,去除舊培養液,用PBS清洗。3、去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來;4、離心1000rpm,5min;5、去除胰...
(一)細胞凍存1.配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;2.取對數生長期的細胞,用胰蛋白酶把單層生長的細胞消化下來,懸浮生長的細胞則直接將細胞移至15ml離心管中、;3.離心1000rpm,5min;4...
實驗證明,細胞在-80℃條件下凍存于RNAlater溶液中并未出現溶解。樣品可隨后在室溫下解凍及再凍存,其RNA的質和量都不會受到影響。保存于-20℃建議用于批量保存。將樣品在4℃條件下孵育過夜,然后轉移到-20℃。樣品在-20℃條件下...
細胞凍存液的作用是將活細胞凍存后,長期保存。一般配置凍存液有兩種配方1.培養基,血清,DMSO配比為7:2:12.血清,DMSO配比為9:1
保存方法:一般先放置于4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;最后放入液氮罐(-196℃)即可,保存時間理論上是無限的。不過,如果只保存在-80℃,一般可以保存一年左右。
保護劑的使用:一般使用DMSO作為保護劑。在細胞凍存中,DMSO使用的最終濃度一般是5-15%。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用95%血清和5%DMSO可能會好些。保護劑在使用時先用培養液或血清配成最終濃度的2倍,再...